Методы выявления мбт при диагностике туберкулеза. МБТ при туберкулезе: расшифровка

💖 Нравится? Поделись с друзьями ссылкой

В.А. Кошечкин, З.А. Иванова

Лабораторная диагностика обеспечивает выполнение главной задачи диагностики и лечения туберкулеза - выявление у больного МБТ.

В лабораторную диагностику на современном этапе входят следующие методики:

  1. сбор и обработка мокроты;
  2. микроскопическая идентификация МБТ в выделяемых субстанциях или тканях;
  3. культивирование;
  4. определение резистентности к препаратам;
  5. серологические исследования;
  6. использование новых молекулярно-биологических методов, включая полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и определение полифиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ).

Сбор мокроты, содержащей МБТ, проводится в специально подготовленном помещении больницы или в амбулаторных условиях. Собранные образцы должны быть немедленно отосланы для микробиологического исследования.

Для этого необходимо использовать специальные контейнеры. Они должны быть прочными, устойчивыми к разрушению, иметь широкую горловину с герметически завинчивающейся пробкой, чтобы предотвратить случайное вытекание из нее содержимого.

Существует два типа контейнеров. Один - распространяемый международной организацией UNICEF (Детский фонд ООН) - является пластмассовой пробиркой с черным основанием, прозрачной крышкой, утилизация которого может быть обеспечена сжиганием. На контейнере (не на крышке) отмечаются данные обследуемого.

Другой тип контейнера сделан из прочного стекла с завинчивающейся крышкой. Такой контейнер может многократно использоваться после дезинфекции, кипячения (10 мин) и полной очистки.

При сборе образцов риск инфицирования очень большой, особенно когда больной выкашливает мокроту. В связи с этим процедуру необходимо проводить как можно дальше от посторонних лиц и в специальном помещении.

Дополнительные процедуры для сбора МБТ
Забор образцов из гортани тампоном. Оператор должен носить маску и закрытый халат. Язык пациента вытягивается изо рта, одновременно вводится тампон за языковое пространство ближе к гортани. Во время кашля пациента можно собрать часть слизи. Тампон помещается в закрытый сосуд и направляется в бактериологическую лабораторию.

Промывные воды бронхов . Для своевременной диагностики туберкулеза легких и других органов большое значение имеет раннее распознавание поражения бронхов. Для этой цели в практике применяется исследование промывных вод бронхов. Методика получения промывных вод не сложна, но надо помнить о противопоказаниях к ее использованию. Людям старческого возраста промывание бронхов следует делать с большой осторожностью. Процедура противопоказана при бронхиальной астме и явлениях сердечно-легочной недостаточности.

Для получения промывных вод бронхов больному анестезируют дыхательные пути. Гортанным шприцем вводят 15-20 мл физиологического раствора, подогретого до 37 °С. Это усиливает секрецию слизистой бронхов. Откашливая, больной выделяет промывные воды. Их собирают в стерильную посуду и обрабатывают обычным способом для бактериоскопии и посева на средах для выращивания МБТ. Производится исследование отдельного бронха или целого ветвления. Метод бактериоскопии промывных вод и особенно их посев способствует увеличению числа находок МБТ на 11-20%.

Промывные воды желудка . Промывные воды желудка нередко исследуются у детей, которые не умеют откашливать мокроту, а также у взрослых при скудном количестве мокроты. Метод не труден и дает довольно большой процент обнаружения МБТ в промывных водах желудка у больных не только легочным туберкулезом, но и туберкулезом других органов (кожи, костей, суставов и др.).

Для получения промывных вод больной утром натощак должен выпить стакан кипяченой воды. Затем желудочным зондом собирают воды желудка в стерильную посуду. После этого воды центрифугируют, мазок делают из гнойных элементов полученного осадка, обрабатывают и красят обычным способом, как мокроту.

Исследование спинно-мозговой жидкости . При подозрении на туберкулезный менингит необходимо в первые дни сделать анализ спинно-мозговой жидкости. При взятии спинно-мозговой жидкости обращается внимание на степень давления, под которым она вытекает из спинно-мозгового канала. Жидкость, вытекающая непрерывной струей и под большим давлением, свидетельствует о повышенном внутричерепном давлении. Жидкость, выделяющаяся крупными частыми каплями, говорит о нормальном давлении, а редкими малыми каплями - о пониженном давлении или о препятствии для ее истечения.

Материал для исследования берут в две стерильные пробирки. Одну оставляют на холоде, и через 12-24 ч в ней образуется нежная паутинообразная пленка. Из другой пробирки берут ликвор для биохимических исследований и изучения цитограммы.

Бронхоскопия . В том случае, если другие методы не сумели обеспечить постановку диагноза, применяется сбор материала непосредственно из бронхов, через бронхоскоп. Биопсия выстилающих бронхи тканей может иногда содержать типичные для туберкулеза изменения, выявляемые при гистологическом исследовании.

Плевральная жидкость . В плевральной жидкости МБТ могут быть выявлены с помощью флотации, но обычно обнаруживаются только в культуре. Чем большее количество жидкости используется для культурального исследования, тем вероятней положительный результат.

Биопсия плевры . Биопсия плевры может быть полезна в тех случаях, когда имеется плевральный выпот. Для ее проведения необходимы обученный персонал, средства для проведения гистологического исследования, специальная биопсийная игла.

Биопсия легкого . Биопсия легкого должна выполняться хирургом в стационарных условиях. Диагноз может быть сделан на основе гистологического исследования или обнаружения МБТ в секционном материале.

Микроскопия мокроты
Уже более 100 лет существует самый простой и быстрый метод выявления кислотоустойчивых микобактерий (КУМ) - микроскопия мазка. КУМ - это микобактерии, способные оставаться окрашенными даже после обработки кислотными растворами. Они могут быть выявлены с помощью микроскопа в окрашенных образцах мокроты.

Микобактерии отличаются от других микроорганизмов характерным составом своей клеточной стенки, состоящей из миколовых кислот. Кислоты благодаря своим сорбционным свойствам обеспечивают способность окрашиваться по методикам, выявляющим КУМ.

Резистентность к стандартным методам окрашивания и способность МБТ сохранять раннее окрашивание является следствием высокого содержания липидов во внешней оболочке клетки. Вообще грамположительные бактерии в своем составе имеют приблизительно 5% липидов или воска, грамотрицательные организмы - около 20% и МБТ – примерно 60%.

Бактериоскопия мокроты или другого отделяемого проводится «простым» методом и методом флотации.
При простом методе мазки приготавливают из комочков мокроты или капель жидкого вещества (экссудата, промывных вод и др.). Материал помещают между двумя предметными стеклами. Один из мазков окрашивают по Граму на общую флору, другой - на туберкулезные микобактерии.

Основным методом окрашивания является карбол-фуксиновый (метод Циля-Нильсена). Главный принцип этого метода - в способности наружной оболочки МБТ адсорбировать карбол-фуксин. Поглощая красный карбол-фуксин, наружная мембрана МБТ настолько прочно связывает краску, что ее нельзя удалить обработкой серной кислотой или солянокислым спиртом. Затем образец обрабатывается метиленовым синим. При эмерсионной микроскопии МБТ появляются в виде красных палочек на синем фоне.

Начиная с 1989 г., в современных лабораториях флюоресцентная микроскопия в значительной степени вытеснила старые методы, основанные на кислотоустойчивости микобактерий. Этот метод базируется на тех же свойствах МБТ, связанных со способностью наружной мембраны МБТ, богатой липидами, удерживать соответствующий краситель, в данном случае - аурамин-родамин. МБТ, поглощая это вещество, одновременно устойчивы к обесцвечиванию солянокислым спиртом. При этом МБТ, окрашенные аурамин-родамином, флюоресцируют под воздействием ультрафиолета или других световых спектров, выделенных соответствующими фильтрами. Под воздействием ультрафиолета МБТ проявляются как ярко-желтые палочки на черном фоне.

Подготовка образца для культурального исследования
При поступлении в современную лабораторию диагностического материала с возможным содержанием МБТ проводятся следующие диагностические манипуляции:

  • 1. Обработка материала миколитическими разжижающими веществами с целью удаления белковых масс.
  • 2. Деконтаминация образца для удаления сопутствующей бактериальной флоры.
  • 3. Встряхивание смеси и ее отстаивание.
  • 4. Холодное центрифугирование.
  • 5. Содержимое центрифужной пробирки используется для микроскопии посева на:
  • 5.1. плотную яичную среду (Левенштейна-Йенсена или Финна III);
  • 5.2. агаровые среды (7Н10 и 7Н11);
  • 5.3. автоматизированную систему бульонного культивирования (МВ/ВасТ или ВАСТЕС MGIT 960).

Молекулярно-генетические методы диагностики МБТ
Расшифровка генома МБТ открыла неограниченные перспективы в разработке генетико-молекулярных тестов, в том числе в изучении и выявлении МБТ и диагностике в организме человека.

Классические методы, применяемые для обнаружения в организме микобактерий туберкулеза, такие, как бактериоскопия, культуральный, иммуноферментный, цитологический, весьма эффективны, но отличаются или недостаточной чувствительностью, или длительностью выявления МБТ. Развитие и совершенствование молекулярно-диагностических методов открыло новые перспективы для быстрого выявления микобактерий в клинических образцах.

Наибольшее распространение получил метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) .
Этот метод основан на амплификации особых фрагментов бациллярной ДНК, которая обнаруживается в диагностических образцах. Тест предназначен для выявления МБТ в мокроте или идентификации разновидности бактерий, которые произрастают в культуральной среде.

Реакция ПЦР позволяет проводить идентификацию МБТ в диагностическом материале за 5-6 ч (включая обработку материала) и обладает высокой специфичностью и чувствительностью (в диапазоне от 1-10 клеток в образце).

У человека. В историях болезни эта аббревиатура несет важную информацию. Микроорганизм поражает практически каждый орган и имеет характерные признаки. Множество методов по выявлению заболевания помогут своевременно начать лечение.

Что это такое?

МБТ (микобактерии туберкулеза) — это болезнетворные микробы способные существенно навредить здоровью человека и привести к смерти. Впервые микроорганизм был обнаружен Робертом Кохом в 1882. Обнаруженную бактерию назвали в честь ученого, так как это принесло значительный вклад в развитие медицины.

Распространенность бактерии в окружающей среде обусловлена ее высокой устойчивостью, способностью сохраняться в почве, молочных продуктах. Микробы поражают человеческий и животных организм и активно выделяются при кашле воздушно-капельным, бытовым, контактным путем, реже через биологические жидкости (моча, кровь). Детям туберкулез может передаться через организм матери.

МБТ поражают практически каждый орган или ткань в теле человека. Наиболее распространенной и известной формой является туберкулез легких. Немного реже встречаются поражения почек, печени, оболочек мозга.

Палочка Коха опасна своей изменчивостью. Однажды человечество уже было в одном шаге от победы над микроорганизмом. В период, когда был выделен антибиотик стрептомицин, активное и не всегда правильное применение препарата вызвало мутацию микобактерии. После чего началась эра резистентных форм туберкулеза не поддававшихся лечению.

МБТ+ и МБТ-

В историях болезни людей, страдающих туберкулезом, при формулировке диагноза обязательно указывается МБТ+ или МБТ-, а также дата выявления палочки Коха. Эти данные расшифровываются:

  • МБТ+ – туберкулез подтвержденный результатами бактериологических исследований мазка мокроты или промывных вод бронхов, что указывает на открытую форму заболевания.
  • МБТ- – микобактерии по данным лабораторного исследования не выявлены, что характерно для больных с закрытой формой туберкулеза.

При положительном результате человек является активным бактериовыделителем. За 5 минут громкого разговора больной может выделить в окружающую среду до 3500 микроорганизмов, что равно одному кашлевому приступу. Чихание с каплями слизи способствует выбросу в окружающую среду до одного миллиона палочек туберкулеза. Эти больные особо опасны для общества, так как распространяют инфекцию с огромной скоростью. На лечении в диспансере им отведена красная зона, что соответствует высокой степени угрозы заражения.

Отрицательный результат свидетельствует о том, что больной неопасен для общества и не выделяет микобактерии туберкулеза в окружающую среду. Передвижение людей с таким результатом не ограничивается пределами диспансера при соблюдении лечения, постоянного лабораторного контроля. Они могут контактировать со здоровым населением без опасности распространить инфекцию. Однако это не значит, что в будущем больной не начнет выделять палочку Коха, только создавая иллюзию безопасности.

Что делают МБТ в организме?

Внедрение микроорганизма в человеческое тело происходит в момент вдыхания палочек Коха, выделенных больным или бактерионосителем. Мбт при туберкулезе оседают в легких, где развитие патологического процесса проходит по двум вариантам.

  1. Бактерия проникает в легкое, где организм успешно препятствует продвижению туберкулезной палочки в кровеносное русло, создавая сдерживающие барьеры. Излюбленной локализацией патогена является верхняя доля органа. Сразу же после инфицирования начинается инкубация палочки Коха сроком от 20 до 40 дней. Самочувствие человека при этом удовлетворительное, общих или специфических симптомов нет, однако болезнь на этом этапе уже активно развивается.
  2. Бактерия попадает в легкие и после непродолжительного сопротивления иммунитета попадает в общий кровоток, где разноситься по всем органам. Если сил организма окажется недостаточно для того, чтобы сконцентрировать микроорганизмы в пределах одного органа, то возникает генерализация инфекции (милиарный туберкулез). Инкубационный период длиться дольше – от 30 до 50 дней, но заболевание протекает намного тяжелее.

Первыми клиническими проявлениями туберкулеза являются слабость, снижение работоспособности, сильная ночная потливость, кашель. Температура обычно повышается до субфебрильных цифр (37,0-38.4 о С), что помогает заподозрить МБТ в происхождении болезни.

Далее при отсутствии лечения палочка Коха полностью проявляет свои агрессивные свойства. Пораженные легкие начинают распадаться, появляются прожилки и сгустки крови в мокроте. Если инфекция добирается до костей, происходят патологические переломы.

При появлении подобных симптомов необходимо срочно обратиться к доктору. На ранних этапах болезнь можно остановить медикаментозными средствами. Позднее обращение нередко требует проведения хирургических операций совместно с приемом препаратов.

Диагностика

Для обнаружения опасного возбудителя используются аппаратные и лабораторные методы диагностики. Оптимальным способом выявления МБТ носителей среди детей является проведение аллергической пробы с туберкулином. После Манту назначается Диаскинтест для дифференциальной диагностики заболевания от усиленного иммунного ответа.

Работающие и учащиеся люди проходят плановую флюорографию легких. Исследование позволяет своевременно выявить и изолировать больного для дальнейшего лечения. На полученном снимке можно увидеть повреждения органа, оставленные бактерией.

С целью конкретного выявления МБТ используют 3 метода диагностики:

  1. Бактериологический анализ.
  2. Бактериоскопическое исследование.
  3. Биологический метод.

Для проведения каждого лабораторного анализа требуется сдать биологическую жидкость – мокрота, кровь, моча, плевральный выпот и даже спинномозговая жидкость. Исследования имеют небольшую погрешность, поэтому сбор биоматериала лучше проводить под контролем врача.

Вывод

МБТ является серьезной угрозой для человечества. Чем раньше была обнаружена туберкулезная палочка, тем легче будет от неё избавиться при помощи лекарственных средств. Своевременное выявление ранних симптомов и плановое лечение болезни поможет уберечь себя и окружающих людей от инфекции.

В разделе на вопрос Что такое "Инфицирован МБТ"? Растолкуйте понятие, пожалуйста. И что это вообще значит? что-то связанное с туберкулёзом.. заданный автором Јурочка Кузьмина лучший ответ это мбт--микобактерии туберкулеза. возбудители этого заболевания
туб. инфицирование не означает, что человек болен. он может быть носителем
но зачастую такой диагноз ставится на основании пробы Манту--исследования крайне недостоверного и низкоинформативного.

Ответ от Ольга [гуру]
Инфицирование МБТ означает, что человек встречается в своей жизни с возбудителями туберкулеза и имеет иммунитет к ним. Иммунитет к туберкулезу не стойкий и если прекращается попадание в организм микобактерий туберкулеза, исчезает и иммунитет. Проба Манту как раз и показывает есть иммунный ответ или нет. В советское время, когда туберкулеза было мало, эта проба почти у всех была отрицательной. Сейчас практически у всех положительная. Но инфицирование МБТ вовсе не означает болезнь.


Ответ от Ёергей Рыженин [гуру]
Микобактерия туберкулеза (МБТ) является главной причиной заболевания туберкулезом человека. Переносчики – человек, домашние и дикие животные, птицы. Во внешней среде микобактерия туберкулеза достаточно устойчива. В воде она может сохраняться до 150 дней. Вне живого организма они остаются жизнеспособными в течение многих месяцев, в особенности в темных, сырых помещениях. МБТ по своей природе нечувствительны ко многим антибиотикам. Диагностика проводится посредством ПРЦ.


Вопрос врачу:

Вопрос к фтизиатру.Инфицирование МБТ-что это?

Здравствуйте! Моей дочери 5 лет, после очередной манту нас направили к фтизиатру. Он поставил диагноз инфицирован МБТ. Назначили рентген грудной клетки, анализы мочи, кровь, кал на я/г и зачем то пройти окулиста. БЦЖ-р.4 (12 месяцев) манту: 2005г. — 13, 2006г. — 15, 2007г. — 11, 2008г. — 13, 2009г. — 13. Рентген сделали. Результаты рентгена: В легких без очаговых и инфильтративных изменений. Корни структурны, не расширены. Диафрагмма не изменина. Нельзя исключить расширение паратрихильных, трахиобронхиальных л/у слева. 1)Как определить когда ребенок был инфицирован? 2) На сколько это серьезно и заразно (у меня еще грудной ребенок, надо ли его обследовать?) 3) если манту с первой была большая почему направляют только сейчас, раньше это был не показатель? 4) помогите расшифровать рентген. Что значит:»Нельзя исключить расширение паратрихильных, трахиобронхиальных л/у слева.» Заранее спасибо за ответ.



Здравствуйте
1. Точно определить момент заражения невозможно, однако судя по результатам пробы манту можно предположить, что заражение произошло в 2006 или ранее.
2. Инфицирование микобактериями туберкулеза (МБТ) может дать начало активной форме туберкулеза, однако в большинстве случаев туберкулез так и не возникает. Инфицированный человек не заразен, и потому в вашем случае нет оснований обследовать грудного ребенка (конечно, если источник инфекции от которого мог заразиться старший ребенок это не человек из вашего окружения).
3. Мы затрудняемся ответить на этот вопрос, так как он относится к компетенции ваших врачей.
4. Данную фразу можно истолковать следующим образом: вполне вероятно, что у ребенка расширены лимфатические узлы, располагающиеся слева от трахеи (по крайней мере нет основания сказать, что лимфатические узлы слева нормальных размеров). Увеличение лимфатических грудной клетки может быть одним из признаков заражения МБТ.

Рассказать друзьям